久久久久久久网-久久久久久久男人的天堂-久久久久久久免费视频-久久久久久久久综合影视网-尤物视频网站在线观看-尤物视频网站在线

技術文章

Technical articles

當前位置:首頁技術文章用于牙周炎源性骨缺損修復的3D打印生物墨水

用于牙周炎源性骨缺損修復的3D打印生物墨水

更新時間:2024-02-18點擊次數:979

牙周病是被世界衛生組織認定為危害人類健康的三大疾病之一。恢復牙周炎引起的骨喪失是避免牙齒松動脫落的關鍵步驟之一。然而,由于生物功能材料的應用單一以及口腔炎癥和細菌微環境的存在,目前臨床上廣泛應用的牙周骨再生材料或技術難以實現牙槽骨再生。南方醫科大學口腔醫院于光濤等人聯合深圳灣實驗室饒浪教授課題組設計開發了一種3D打印生物墨水用于牙周炎源性骨缺損修復,該生物墨水由EPLGMA為主體并裝載干細胞和細胞囊泡用于發揮抗菌抗炎促成骨功能。相關研究成果以題為“3D-printed bioink loading with stem cells and cellular vesicles for periodontitis-derived bone defect repair"的文章發表在《Biofabrication》上。南方醫科大學口腔醫院博士研究生趙瑜越、深圳灣實驗室博士后朱文祥為第一作者,南方醫科大學口腔醫院于光濤、容明燈、麻丹丹和深圳灣實驗室饒浪教授為共同通訊作者。



圖片


圖1. 仿生3D打印墨水的制備工藝及其對牙周炎源性骨缺損的生物學作用示意圖



作者首先通過摩方精密microArch® S230(精度:2 μm)打印了以EPLGMA為主體的仿生模板,結合模板法和光引發聚合合成了EPLGMA@PDLSCs@MDCSs-MV(EPM)。具體步驟如下:首先,將GMA緩慢滴入EPL溶液中,得到EPLGMA,在藍光(405 nm)照射后轉化為交聯水凝膠。然后,將乳牙牙周膜的PDLSCs和MDSCs膜囊泡(MDSCs- MV)加入EPLGMA中形成溶液生物墨水。通過掃描電鏡觀察凍干生物墨水的微觀結構,我們可以清楚地看到網狀多孔結構,這有利于促進PDLSCs的增殖、遷移和營養物質或代謝物的運輸,從而發揮作用(圖2)。

圖片


圖2. EPLGMA的特點。(a) EPLGMA制備工藝示意圖。(b) EPLGMA狀態:藍光照射前(左)和照射后(右)。(c)凍干EPLGMA的掃描電鏡。(d) EPL和EPLGMA的1H NMR譜。(e) EPLGMA的時間掃描流變分析。(f) EPLGMA的粘度。(g) EPLGMA的壓應力-應變曲線。



隨后,作者探究了仿生墨水的3D打印性能。作者利用Solidworks軟件建立三維CAD模型,通過對于不同結構的模型進行打印,證明仿生墨水打印出的結構在大尺寸上仍能夠保持一定的精準度。隨后作者用激光共聚焦顯微鏡對打印形狀內的細胞進行顯色觀察,結果顯示細胞在3D打印仿生墨水中的形態下分布均勻,并且保持良好的活力(圖3)。表明了EPM是一種高效、可行、個性化的打印生物墨水。

圖片


圖3. 3D打印系統對EPLMA生物墨水進行個性化3D打印。



為了驗證EPL天然的抗菌潛力,作者將生物墨水與牙齦卟啉單胞菌共培養兩個小時,并將其涂布到血平板上進行觀察。24小時后可見EPM組表現出良好的抗菌效果(圖4)。

圖片


圖4. EPM的抗菌性能。(a) EPM抗菌功能示意圖。(b) PBS(對照)和EPM處理2 h后的牙齦卟啉單胞菌(P.g)的血平板培養照片。(c)不同組牙齦卟啉單胞菌數量的定量評價。(d) PBS(對照)和EPM處理后的牙齦卟啉單胞菌活/死染色。



控制炎癥是牙周炎治療過程中重要步驟。作者利用MDSCs在抗炎中發揮的作用,首先從荷瘤小鼠體內收集MDSCs,并提取MDSCs-MV,然后采用蛋白圖譜分析了MDSCs-MV的蛋白組成。通過KEGG通路分析,結合免疫熒光實驗結果,作者表明MDSCs-MV可以通過CD39/CD73-腺苷信號通路靶向抑制微環境中的T細胞從而發揮抗炎功能(圖5)。

圖片


圖5. MDSCs-MV的抗炎特性(a) MDSCs-MV生物學功能示意圖。(b) Western blot檢測MDSCs和MDSCs- mv的特征性膜蛋白標志物。(c) MDSCs-MV孵育后T細胞的代表性共聚焦圖像。(d) CD3和MDSCs-MV熒光強度線掃描。(e)流式細胞術定量T細胞MDSCs-MV的熒光強度。(f) Elisa法檢測轉染MDSCs-MV或不轉染MDSCs-MV后T細胞分泌腺苷的情況。(g)經MDSCs-MV或不經MDSCs-MV孵育后CD4+ T細胞CFSE稀釋的典型流式細胞術圖。(h)不同組CD4+ T細胞CFSE稀釋度的定量分析。(i) CD8+ T細胞加或不加MDSCs-MV孵育后CFSE稀釋后的典型流式細胞術圖。(j)不同組CD8+ T細胞CFSE稀釋度的定量分析。



最后,為了評估3D生物墨水的成骨能力,作者構建了SD大鼠頜骨骨缺損模型,并同期模擬炎癥狀態,然后根據骨缺損的面積以及深度,打印出合適的形狀并進行了驗證。經過3個月的治療后,通過Mirco-CT以及免疫熒光實驗結果,EPM@Pg組展示出了最佳的抗菌、抗炎以及促成骨效果(圖6)。

圖片


圖6. EPM的體內骨再生效果。(a)生物墨水治療人工牙周炎骨缺損小鼠模型的實驗設計。(b)用不同生物墨水完成的3d打印。(c)生物墨水治療牙周炎骨缺損的手術過程圖片。(d)術后2、3個月不同治療組下頜骨缺損區具有代表性的三維Micro-CT圖像。(e) - (i) BV (f)、BV/TV (f)、Tb.N (g)和Tb.Th(h)的定量分析。



結論:作者利用EPLGMA加載PDLSCs和MDSCs-MV,制作了一種新型的、可定制的多功能3D打印模塊,用于治療牙周炎源性骨缺損。該EPM材料繼承了EPL的天然抗菌特性,可以有效地殺滅牙周病細菌,并且在抗炎方面,其中的MDSCs-MV通過CD73/CD39/腺苷信號通路抑制T細胞。總之,EPM支架表現出良好的抗菌、抗炎和骨再生效果。與傳統骨粉填充材料相比,3D打印仿生墨水材料具有更加優異的生物性能



青青青草视频在线观看| 夜夜操天天爽| 青青久在线视频| 天天做人人爱夜夜爽2020 | 精品视频免费看| 日韩在线观看视频免费| 成人免费观看网欧美片| 日韩在线观看视频黄| 国产一区二区精品尤物| 成人在免费观看视频国产| 九九久久99| 国产视频久久久| 国产麻豆精品hdvideoss| 一级毛片看真人在线视频| 久久国产一区二区| 99色视频在线观看| 国产不卡高清| 久久国产一区二区| 日本免费看视频| a级黄色毛片免费播放视频| 美女免费精品视频在线观看| 国产福利免费观看| 欧美夜夜骑 青草视频在线观看完整版 久久精品99无色码中文字幕 欧美日韩一区二区在线观看视频 欧美中文字幕在线视频 www.99精品 香蕉视频久久 | 国产精品1024永久免费视频| 国产精品自拍在线观看| 一 级 黄 中国色 片| 久久99欧美| 精品国产三级a∨在线观看| 韩国三级香港三级日本三级| 日本在线www| 日本在线不卡免费视频一区| 好男人天堂网 久久精品国产这里是免费 国产精品成人一区二区 男人天堂网2021 男人的天堂在线观看 丁香六月综合激情 | 亚洲第一页色| 欧美激情一区二区三区视频 | 亚洲精品中文一区不卡| 青青青草影院 | 日韩中文字幕一区二区不卡| 日韩中文字幕一区二区不卡| 日韩中文字幕在线亚洲一区| 精品毛片视频| 九九精品久久| 精品国产一区二区三区久| 成人影院久久久久久影院| 九九免费精品视频| 国产极品精频在线观看| 国产不卡高清| 一级女人毛片人一女人| 99久久精品国产高清一区二区| a级毛片免费观看网站| 欧美一级视频免费| 免费毛片播放| 一级女性大黄生活片免费| 国产极品白嫩美女在线观看看| 久久国产精品永久免费网站| 麻豆系列 在线视频| 成人影院一区二区三区| 天堂网中文字幕| 精品久久久久久中文字幕一区 | 日韩在线观看网站| 欧美电影免费| 精品久久久久久中文| 亚洲天堂免费观看| 青青久在线视频| 成人影视在线观看| 中文字幕一区二区三区 精品 | 一级女性全黄久久生活片| 午夜欧美福利| 九九久久国产精品| 日本特黄特色aaa大片免费| 日本久久久久久久 97久久精品一区二区三区 狠狠色噜噜狠狠狠狠97 日日干综合 五月天婷婷在线观看高清 九色福利视频 | 欧美大片一区| 国产成人女人在线视频观看 | 成人免费一级纶理片| 欧美电影免费| 日本在线播放一区| 国产一区免费在线观看| 日日夜人人澡人人澡人人看免| 国产福利免费观看| 亚洲天堂一区二区三区四区| 日韩在线观看免费| 九九免费精品视频| 韩国毛片免费大片| 一本高清在线| 精品国产一区二区三区久| 日韩欧美一二三区| 免费一级生活片| 日本特黄特色aaa大片免费| 国产成+人+综合+亚洲不卡| 日韩av片免费播放| 国产精品1024永久免费视频| 日韩中文字幕在线播放| 亚欧成人毛片一区二区三区四区| 亚洲 激情| 美女免费毛片| 日韩中文字幕一区| 天天做人人爱夜夜爽2020 | 成人a级高清视频在线观看| 超级乱淫伦动漫| 精品久久久久久免费影院| 亚欧乱色一区二区三区| 日韩免费在线观看视频| 国产一区二区精品久久| 日本免费看视频| 欧美国产日韩一区二区三区| 久久国产精品永久免费网站| 99久久精品国产麻豆| 国产不卡在线看| 久久精品成人一区二区三区| 日本免费乱人伦在线观看| 四虎影视久久| 黄视频网站免费观看| 国产91精品一区二区| 精品视频免费在线| 午夜在线影院| 午夜久久网| 欧美激情中文字幕一区二区| 你懂的在线观看视频| 国产麻豆精品免费视频| 亚欧成人毛片一区二区三区四区| 韩国毛片 免费| 99色视频| 国产视频在线免费观看| 久久成人综合网| 欧美爱爱网| 韩国三级视频网站| 国产精品自拍亚洲| 超级乱淫伦动漫| 午夜精品国产自在现线拍| 99色视频| 免费国产在线观看不卡| 日韩男人天堂| 九九久久国产精品| 国产91精品露脸国语对白| 午夜欧美福利| 久草免费在线视频| 日韩在线观看免费| 精品久久久久久中文字幕一区| 日日日夜夜操| 免费国产在线观看| 久久精品人人做人人爽97| 成人a大片高清在线观看| 黄视频网站免费看| 成人影院久久久久久影院| 亚洲女初尝黑人巨高清在线观看| 日韩av成人| 欧美另类videosbestsex久久| 99久久精品国产高清一区二区| 亚欧视频在线| 天堂网中文字幕| 国产成人精品影视| 亚洲第一页色| 九九免费精品视频| 日韩欧美一及在线播放| 国产不卡高清在线观看视频| 久久国产一久久高清| 成人免费观看网欧美片| 尤物视频网站在线观看| 欧美大片aaaa一级毛片| 99久久精品国产免费| 国产极品白嫩美女在线观看看| 人人干人人草| 亚欧视频在线| 国产麻豆精品高清在线播放| 欧美夜夜骑 青草视频在线观看完整版 久久精品99无色码中文字幕 欧美日韩一区二区在线观看视频 欧美中文字幕在线视频 www.99精品 香蕉视频久久 | 999久久久免费精品国产牛牛| 一级毛片视频在线观看| 国产麻豆精品免费视频| 成人高清视频在线观看| 欧美电影免费| 亚洲 激情| 欧美国产日韩在线| 欧美国产日韩在线| 日韩av成人| 欧美爱色| 国产成人啪精品| 久久久久久久免费视频| 欧美国产日韩在线| 二级片在线观看| 久久精品店| 青青久在线视频| 日韩免费在线视频| 日本特黄特色aaa大片免费| 香蕉视频久久| 日本乱中文字幕系列 | 日韩一级黄色| 青青久久网| 韩国三级视频在线观看| 久久福利影视| 日本久久久久久久 97久久精品一区二区三区 狠狠色噜噜狠狠狠狠97 日日干综合 五月天婷婷在线观看高清 九色福利视频 | 四虎影视久久| 一级片片| 欧美1卡一卡二卡三新区| 国产网站在线| 日韩专区第一页| 午夜久久网| 日韩综合| 黄色免费网站在线| 99色视频在线观看| 九九久久99综合一区二区| 国产视频久久久|